Aspectos morfológicos e moleculares de carrapatos do complexo Amblyomma maculatum

Abstract

O objetivo do presente estudo foi comparar os aspectos morfológicos e moleculares das populações de carrapatos do complexo Amblyomma maculatum do Estado do Maranhão com de outras localidades do Brasil, depositadas na Coleção Nacional de carrapatos da Universidade de São Paulo. Foram coletados espécimes do município de Bacurituba (02°42' 21" S 44° 44' 16" O) no Estado do Maranhão e comparadas com espécimes da Coleção Nacional de Carrapatos da Universidade de São Paulo. Os carrapatos do Maranhão foram coletados de suínos (Sus scrofa domesticus) criados em regime extensivo e transportados para a Universidade de São Paulo. A primeira geração de carrapatos reproduzidas em laboratório foi obtida a partir de oito progenitoras nativas do Maranhão.Os carrapatos foram acondicionados em potes de plásticos devidamente identificados e acondicionados em estufa BOD com 27 ˚C e 90% UR Após a eclosão, as fases imaturas foram postas para a infestação em Cavia porcellus até a obtenção das fases adultas, alvo do estudo comparativo. Os espécimes foram identificados por chave e foram mensurados utilizando19 e do Microscópio Carl Zeiss modelo SteREO Discovery.V12 e seu software ZEN paramensuração das variáveis: Comprimento da Coxa I e Espinho I (esquerdos e diretos), Coxa IV e Espinho IV (esquerdos e direitos), Comprimento e Largura do Capítulo. A extração de DNA para as análises moleculares foi realizada de acordo com o protocolo Isotiocianato de Guanidina (GT). Uma vez extraído o DNA, foram submetidos a dois protocolos de reação em cadeia pela polimerase (PCR). Dois marcadores foram utilizados buscando amplificar fragmentos de aproximadamente 460-pb do gene mitocondrial 16S rRNA e 1200-pb do segundo espaço transcrito interno (ITS2) do DNA ribossômico nuclear. Os espécimes de fêmeas e machos foram avaliados morfologicamente e identificados como Amblyomma triste. Indivíduos da Coleção Nacional de Carrapatos “Danilo Gonçalves Saraiva” foram comparados com os espécimes do presente estudo. Observou-se diferença estatística (P<0,05) para as dimensões (Coxa direita I/ Espinho direto I; Coxa direita IV/Espinho direito IV; Coxa esquerda IV/Espinho esquerdo IV) dos Espinhos da Coxa I e Coxa IV. Não houve diferença estatística (P>0,05) para a razão do Comprimento do Capitulo pela Largura do Capitulo. Para as fêmeas, observou-se diferença estatística para espinho direito I, coxa esquerda I, espinho esquerdo I e largura do capitulo. As sequências obtidas quando comparadas, de acordo com o gene mitocondrial 16S rRNA e sequências derivadas do ITS2 ribossômico nuclear, observa-se que os espécimes encontrados no Maranhão apresentam similaridade com Amblyomma maculatum oriundo dos Estados Unidos.