Variabilidade genética de Prochilodus sp. (characiformes, prochilodontidae) em bacias hidrográficas do estado do Maranhão

Abstract

Na família Prochilodontidae, o gênero Prochilodus constitui um importante recurso pesqueiro. Os peixes deste gênero apresentam características morfológicas bastante conservada dificultando assim a identificação a nível de espécie, gerando incertezas quanto ao status taxonômico entre Prochilodus lacustris e Prochilodus nigricans. No presente trabalho objetivou-se determinar os índices de variabilidade genética de Prochilodus sp. nas principais bacias hidrográficas do estado do Maranhão, com base em sequencias do DNA mitocondrial e nuclear. A amostragem foi constituída de espécimes das principais bacias hidrográficas Maranhenses (Tocantins, Itapecuru, Mearim, Turiaçu, Pericumã e Parnaíba) e da Bacia Amazônica (Santarém, Cupari, Xingu, Jacareacanga, Itaituba) coletados com diferentes apetrechos de pesca, sendo identificados de acordo com literaturas especificas e posterior confirmação por especialista. O material testemunho (voucher) foi depositado no Museu de Zoologia da Universidade Estadual de Londrina/MZUEL e no Laboratório de Genética Biologia Molecular do CESC/UEMA. Amostra de tecido foram retirados e conservados em álcool 70% para análises genéticas. A extração do DNA total foi realizada a partir do tecido muscular utilizando-se o Kit Wizard Genomic DNA Purification Promega seguindo instruções do fabricante com algumas modificações. O isolamento e amplificação dos genes de interesse foram realizados através da técnica de PCR utilizando primers específicos e posterior sequenciamento. Sequências de Hoplias malabaricus (GU702203.1) e Leporinus sp. (FJ418763.1) obtidas do GENBANK juntamente com sequências de Leporinus sp. e Hoplias malabaricus obtidas no Laboratório de Genética e Biologia Molecular do CESC/UEMA foram incorporadas as análises como outgroup para os marcadores rRNA16S, TROP, COI e Cyt b. Para as análises foram utilizados os programas BioEdit, DnaSPv6, MEGA 7, Arlequim 3.5. Os resultados revelaram sequências de 567pb para o gene rRNA16S, 574pb para o gene COI, 839pb para o gene Cyt b e 290pb para o marcador nuclear TROP, e mostraram uma forte similaridade genética entre P. lacustris e P. nigricans com valores de divergência genética de 0% a 0,2% para o rRNA16S, de 0% a 0,5% para o gene COI, de 0% a 2,4% para o gene Cyt b e de 0% a 0,7% para o TROP. Os níveis de divergência genética intra populacional variou de 0 a 0,9 %, evidenciando baixo índice de divergência genética e revelando um alto grau de similaridade, sugerindo a ocorrência de um único táxon para bacias Maranhenses e Amazônia. A amova mostrou valores de Fst de baixo a moderados (rRNA16S - 0,06; COI - 0,41 e TROP - 0,09) exceto para o Cyt b que apresentou Fst com valor de 0,92. As árvores filogenéticas mostraram para todos os marcadores um clado fortemente suportado, onde os espécimes obtidos de P. lacustris das bacias Maranhenses e P. nigricans das bacias Amazônica agruparam-se fortemente com valores de bootstrap de 94 a 100%. Nossos resultados confirmam a alta similaridade genética entre os táxons P. lacustris e P. nigricans nas bacias estudadas apontando para uma revisão taxonômica no grupo