Produção in vitro de embriões bovinos utilizando diluidor com adição de insulina ou fator de crescimento semelhante à insulina tipo 1 (IGF-1)

Abstract

A produção in vitro de embriões bovinos apresenta baixas taxas de desenvolvimento embrionário quando comparadas à produção in vivo. Com o objetivo de avaliar o efeito na produção in vitro de embriões bovinos, foi adicionada Insulina e/ou Fator de crescimento semelhante à insulina tipo-1 (IGF-1) ao diluidor do sêmen. Ovários provenientes de abatedouros foram aspirados e selecionados somente Complexos cumulus oócitos (CCOs) grau I, II e III, e em seguida incubados por 24 horas a 38,8°C e 5% de CO2. Após a maturação, uma palheta de sêmen de cada tratamento (Controle, Insulina, IGF-1 e Insulina + IGF-1) foi descongelada e colocada em gradiente de Percoll para retirada da dose inseminante. Os gametas foram co-incubados de 18 a 22 horas e em seguida cultivados por sete dias. Decorridas 48 horas, foi avaliado a taxa de clivagem (D2), e sete dias após a taxa de blastocistos (D7). Foram aspirados 679 ovários, recuperados 671 oócitos grau I, 329 grau II e 152 grau III, distribuídos em seis repetições. Não houve diferença significativa para as taxas de clivagem. O tratamento Controle apresentou maiores taxas de desenvolvimento embrionário. O tratamento com Insulina resultou em maiores produções de mórulas (47,7%). Os tratamentos com IGF-1 e Insulina + IGF-1 apresentaram maiores taxas para o estádio de blastocisto inicial. O tratamento Controle resultou em maiores taxas de blastocisto expandido (51,0%). Não houve diferença estatisticamente (P > 0,05) para qualidade grau I. O tratamento com IGF-1 apresentou maiores taxas (35,3%) para a qualidade grau II. Para a qualidade grau III o tratamento com Insulina (46,4%) foi superior. O tratamento Controle apresentou menor taxa de degenerados (45,1%) e maiores taxa de não fertilizados (54,9%). Portanto podemos concluir que adição de Insulina e/ou IGF-1 ao diluidor do sêmen não aumentou as taxas de clivagens e de blastocistos dos embriões produzidos in vitro, não melhorando a qualidade embrionária