Criopreservação de sêmen bovino com antioxidantes: avaliações funcionais e fecundação in vitro

Abstract

O objetivo deste trabalho foi avaliar a adição de antioxidantes no processo de criopreservação de sêmen bovino, a partir de testes complementares (motilidade e vigor espermáticos pós – criopreservação, teste de termorresitência rápido, integridade de membranas plasmática e acrossomal, estresse oxidativo e morfologia espermática) e na fecundação in vitro (FIV). Para tanto, o ejaculado de nove animais foram divido em quatro frações, correspondente a cada tratamento, sendo estes: grupo controle – sêmen diluído com extensor Tris – gema; grupo vitamina – sêmen diluído em Tris – gema acrescido de 2,5 mM/mL de vitamina C; grupo glutationa – sêmen diluído em Tris – gema acrescido de 2,5 mM/mL de glutationa reduzida e o grupo associado – sêmen diluído em Tris – gema acrescido de vitamina C e glutationa reduzida com metade das concentrações (1.25mM/mL). Posteriormente o sêmen foi envasado em palhetas francesas e submetidas a criopreservação utilizando equipamento automatizado TK3000®. Para FIV, ovários de abatedouros foram aspirados para obtenção dos oócitos grau I e II. Estes foram submetidos à maturação in vitro (MIV), seguida de fertilização in vitro (FIV) onde cada gota contendo os oócitos maturados, foi adicionada o sêmen capacitado correspondente a cada tratamento. A taxa de fecundação foi atribuída de embriões divididos em dois ou mais blastômeros. Houve diferença estatística (P< 0,05) na motilidade espermática para o grupo associado, contudo para vigor espermático os grupos não diferiram, o mesmo ocorreu para integridade de membrana plasmática e acrossomal. O grupo associado apresentou maior percentual de células com estresse oxidativo (P< 0,05) e menores percentuais de defeitos espermáticos maiores. O grupo glutationa apresentou maior taxa de fecundação (P< 0,05). Dessa forma, concluiu-se que a associação da vitamina C e glutationa reduzida favoreceu a motilidade espermática pós descongelação, porém os antioxidantes não apresentaram efeito preventivo quanto aos danos estruturais sofridos pelas membranas plasmáticas. E que associação dos antioxidantes proporciona maior estresse oxidativo e o uso de glutationa reduzida garante maior capacidade fecundante.