Caracterização e toxicidade do DMSO em resfriamento do sêmen do Trachelyopterus galeatus (Siluriformes: Auchenipteridae)

Abstract

O conhecimento das características seminais de uma espécie é importante para o desenvolvimento dos protocolos de preservação, promovendo aprimoramento e sucesso na reprodução artificial. A preservação do sêmen sob refrigeração é uma técnica simples e de baixo custo que promove a viabilidade espermática por horas ou dias, facilitando metodologias de reprodução artificial. O presente estudo teve como objetivo determinar as características físicoquímicas do sêmen do cangati (Trachelyopterus galeatus) e avaliar a toxicidade do DMSO (dimetilsulfóxido) sobre o sêmen da espécie durante o resfriamento. Durante o período reprodutivo, foram coletadas amostras de 20 animais, diretamente do gonopódio em que o sêmen foi coletado com auxílio de seringas. As amostras de sêmen coletada, foram analisadas quanto à cor, volume, pH, taxa de motilidade, concentração espermática e identificação de alterações morfológicas. Para o teste de refrigeração, foi utilizado o sêmen de 5 peixes resultando em 5 amostras de sêmen, que foram diluídas em HBSS (Solução Salina Equilibrada de Hank’s) adicionado de dimetilsulfóxido (DMSO) em diferentes concentrações (2,5%, 5,0% e 10%) na proporção de 1:4 e in natura. As amostras foram mantidas a 4°C por 72 horas e avaliada em intervalos de 0, 12, 24, 36, 48, 60 e 72 hrs. O sêmen do cangati apresentou coloração branca e aspecto leitoso, sem variação de pH entre os espécimes, enquanto que o volume variou 66,6% entre as amostras. A taxa de motilidade foi de 90,6 ± 13,4% e a concentração de 2,7 ± 0,7 x106 células mL-1 . O sêmen de T. galeatus apresentou 14,21% de danos primários e 15,14% danos secundários. Foram identificadas alterações tanto na cabeça quanto na cauda dos espermatozoides. As maiores frequências estavam associadas às anormalidades de cauda dobrada (12,45 ±0,32%), cauda fortemente enrolada (4,90 ±0,15%) e defeito na cabeça (3,5% ±0,16). Enquanto que as menores frequências foram relacionadas às alterações de cauda em formato retroaxial (3,09 ±0,13%), cabeça sem cauda (2,54 ±0,12%), cauda fraturada (1,57 ±0,07%), cauda enrolada na cabeça (1,14 ±0,05%) e espermatozoide com cauda contendo gota citoplasmática (0,14 ± 0,01%). Durante a refrigeração, foi verificada boa qualidade e viabilidade do sêmen in natura após 48 horas. O declínio da motilidade foi diretamente proporcional ao tempo de armazenamento. O mesmo resultado foi observado nos tratamentos com o DMSO. Foi encontrada diferença significativa (p<0,05), entre os intervalos de tempo do sêmen diluído em HBSS para taxa de motilidade e observado que a partir do intervalo de 12 horas, os espermatozoides estavam completamente inativos. O mesmo acontecendo para HBSS + DMSO (10%). Não houve diferença significativa entre os tratamentos, sêmen in natura, HBSS+DMSO 2,5% e HBSS+ DMSO 5,0%, estes tratamentos indicaram maiores porcentagens após 48 horas de refrigeração (35± 8,6%), (35±5%) e (37,5±10%) respectivamente. Os tratamentos com 2,5% e 5,0 % de DMSO apresentaram porcentagem de células móveis de 20±4 após 72 horas de refrigeração. A refrigeração do sêmen de cangati é uma alternativa viável, sendo possível manter por 48 horas uma apropriada qualidade e viabilidade das células espermáticas. O uso do crioprotetor DMSO nas concentrações de 2,5% e 5,0% incorporado ao diluidor HBSS favorece o prolongamento da viabilidade dos espermatozoides com porcentagem de células móveis de 35 ± 5.0 % e 37,5± 10,3% respectivamente após 48horas de refrigeração