Estudo sorológico e molecular de Ehrlichia canis (Rickettsiales: anaplasmataceae) em cães e carrapatos no município de Caxias, Maranhão, Brasil

Abstract

A erliquiose monocítica canina é causada por Ehrlichia canis, uma espécie de riquétsia gramnegativa da família Anaplasmataceae. Os objetivos desse estudo foram avaliar a ocorrência de Ehrlichia canis em cães e carrapatos naturalmente infectados, em domicílios no município de Caxias, no Estado do Maranhão; Quantificar a taxa de infestação de carrapatos nos cães; Determinar a soroprevalência de Ehrlichia spp. em cães no ambiente urbano e rural; Detectar a presença de Ehrlichia spp. em cães e carrapatos por técnica molecular. Foram coletadas amostras de sangue de 103 cães sendo os mesmos provenientes de residências localizadas no município e 1.473 carrapatos. Dentre os animais analisados, 53 (51,4%) mostraram reatividade ao antígeno de E. canis pela RIFI e 10 (9,7%) amostras apresentaram resultado positivo pela PCR para E. canis. Para PCR dos carrapatos, foram processados 534 espécimes para pesquisa do gene dsb e dessas 25 (4,6%) espécimes de R. sanguineus foram positivos. As variáveis bairro/localidade e infestação por carrapatos foram estatisticamente significativas quanto à infecção por E. canis. Através da ferramenta BLASTn, as sequências obtidas neste estudo foram comparadas e mostraram identidade de 96% a 100% em relação à outras sequências de E. canis disponíveis no Genbank™. A reconstrução filogenética gerou uma árvore com topologia resultando na formação de dois clados bem definidos. A topologia da árvore filogenética apresentou dois clados bem definidos. O primeiro clado (96% de bootstrap) foi formado por amostras caracterizadas como Ehrlichia sp. com o protótipos de Ehrlichia canis (DQ460716|Jaboticabal) e Ehrlichia canis (CP000107.1|Strain. Jake). O segundo clado (98% de bootstrap) formou-se com os protótipos de Ehrlichia canis (KR732922.1| CR1 Costa Rica; AF403710.1|Estados Unidos; GU586135.1|Uberlândia; KR732921.1| CR2 Costa Rica). A frequência de cães sororreativos foi maior nos animais da zona rural do município estudado; O sequenciamento do fragmento da PCR amplificado, baseada no gene dsb confirmou pela primeira vez a detecção de E. canis em amostras de sangue e carrapatos obtidos de cães do município de Caxias-MA